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為確保培養基的質量,需要注意些什么?

更新時間:2023-06-09  |  點擊率:1517
  培養基是微生物試驗的基礎,直接影響微生物試驗結果,而成品預裝培養基是培養基中的一種,是由脫水培養基*溶解于水中,矯正PH值,然后滅菌和分裝于平皿而成。無論是實驗室配制的培養基或商品化的成品預裝培養基,其質量都依賴于其制備的整個過程。采用不適宜方法制備的培養基將影響微生物的生長或復蘇,從而影響試驗結果的可靠性。所以要確保培養基的質量,需特別注意以下事項:
  1.選擇適宜的培養基制備方法,不得使用結塊或顏色發生改變的脫水培養基。
  2.培養基滅菌應按照生產商提供的或經驗證的參數進行,避免采用不適當的加熱和滅菌條件,而引起培養基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。
  3.應確定每批培養基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測定)。若培養基處方中未列出pH值的范圍,除非經驗證表明培養基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規定值±0.2。
  4.成品預裝培養基應確保無菌,并且平皿不得破裂,盡量避免形成氣泡,固體培養基表面不得產生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結晶,不得污染微生物等。
  5.培養基升溫滅菌過程中溫度上升緩慢或滅菌后降溫過慢,可能導致培養基的過熱或過度滅菌,一定程度上會降低微生物培養基促生長的質量,所以成品預裝培養基應通過微生物促生長試驗進行驗證。
  6.用于環境監控的培養基必須特別防護,最好采用三層包裝和終端滅菌。不建議采用實驗室自制的培養皿通過100%預培養后用于潔凈區環境采樣,因為預培養過程中失水會影響微生物生長,且還存在培養皿被污染的可能。
  7.貯藏和運輸條件應使成品培養基較低限度的失去水分并提供機械保護、避光保存。含瓊脂培養基不得在0℃或0℃以下存放,冷凍可能破壞凝膠特性。
  培養基制備過程質量控制和貯藏條件是提供優質培養基的保證。潔凈區環境浮游菌、沉降菌及表面微生物監測用培養基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養基(TSA),必要時可加入適宜的中和劑;當監測結果有疑似真菌或考慮季節因素影響時,可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養基(SDA)。